"Методические указания по определению триадимефона (байлетона) методом тонкослойной хроматографии в воде" (утв. Минздравом СССР 22.05.1985 N 3892-85)

Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

22 мая 1985 г. N 3892-85

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТРИАДИМЕФОНА (БАЙЛЕТОНА) МЕТОДОМ

ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ В ВОДЕ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

1. Краткая характеристика фунгицида

1-(4-хлор-фенокси),3,3-диметил-1(1н-1,2,4-триазолил-1)-2-бутанон.

Структурная формула Эмпирическая формула

───

Cl-// \\-O-CH-COC(CH ) C H ClN O

\ ___ / │ 3 3 14 16 3 2

─── N

/ \

││ N

││ ││

N───

Байлетон - бесцветный порошок, не имеющий запаха. Общепринятое название

- триадимефон.

Молекулярная масса - 293,7. Температура плавления - 82,3 °С, растворим

в воде (0,026 г действующего вещества на 100 г при 20 °С). Хорошо растворим

в большинстве органических растворителей. При нормальных условиях стабилен:

в 0,1 н растворах серной кислоты и щелочи не разлагается в течение 24 часов

при 20 °С. Байлетон выпускается в форме 5 и 25% смачивающегося порошка.

Токсичность: ЛД для крыс - 572 мг/кг. Препарат предназначен для борьбы с

50

мучнистой росой и ржавчиной грибов, кроме того эффективен против других

возбудителей болезней, как, например, Rhynochosporium secalis.

2. Методика определения байлетона в воде методом

тонкослойной хроматографии

2.1. Принцип метода

Метод основан на экстракции фунгицида из анализируемой пробы органическим растворителем и хроматографии на пластинке "Силуфол".

2.2. Метрологическая характеристика метода

Диапазон определяемых концентраций - 0,05 - 20 мг/л.

Предел обнаружения на хроматографии - 1 мкг, предел обнаружения в воде - 0,01 мг/л.

┌─────────────┬──────────┬───────┬──────────┬────────┬────────┬───────────┐

│Анализируемый│Экстрагент│ Число │Обнаружено│Среднее │Относит.│ Доверит. │

│ объект │ │повтор.│ в % │значение│стандар.│ интервал │

│ │ │ │ │опр. в %│отклон.,│ среднего, │

│ │ │ │ │ │ % │ %, при │

│ │ │ │ │ │ │ р = 0,95; │

│ │ │ │ │ │ │ n = 5 │

├─────────────┼──────────┼───────┼──────────┼────────┼────────┼───────────┤

│Вода │н-Гексан │5 │94 │94,4 +/-│24,89 │24,4 │

│ │ │ │64 │12,45 │ │ │

│ │ │ │100 │ │ │ │

│ │ │ │92 │ │ │ │

│ │ │ │122 │ │ │ │

└─────────────┴──────────┴───────┴──────────┴────────┴────────┴───────────┘

2.3. Реактивы и растворы

Ацетон, хч, ГОСТ 2603-79.

Бензол, хч, ГОСТ 5955-75.

н-Гексан, хч, ТУ 6-09-3375-78.

Спирт этиловый, ТУ 6-09-1710-77.

Натрий сернокислый безводный, ч, ГОСТ 4166-81.

Стандартный раствор байлетона в этиловом спирте с содержанием 200 мкг/мл. Раствор устойчив в течение 3-х месяцев при хранении на холоде.

Проявляющие реактивы

1. 0,4% ацетоновый раствор бромфенолового синего с 2% раствором азотнокислого серебра в равных объемах. Для осветления фона пластинки после опрыскивания проявителем 1 готовят осветляющий раствор 2.

2. 2% водный раствор лимонной кислоты (можно уксусной). Лимонная кислота, чда, ГОСТ 3652-74.

Смесь растворителей: гексан и ацетон (72:28), изооктан:ацетон (70:30), бензол и этилацетат (90:10).

2.4. Получение химически чистого байлетона

Стандартный раствор содержит 200 мкг/мл.

Из торговой фирмы 25% смачивающегося порошка байлетона готовят насыщенный раствор в этиловом спирте, помещают его на водяную баню при 35 - 40 °С и оставляют до полного растворения препарата, затем раствор отфильтровывают и выпаривают до небольшого объема и оставляют в холодильнике до кристаллизации. Выпавшие кристаллы отфильтровывают, промывают охлажденным этиловым спиртом и высушивают на воздухе, затем растворяют в мерной колбе с притертой пробкой в 100 мл этилового спирта.

Дополнительным критерием степени чистоты препарата служит хроматографическая индивидуальность, при определении которой стандартные растворы, будучи нанесенными на пластинку в количестве 5 - 10 мкг, не создают посторонних проявлений после хроматографирования.

2.5. Приборы и посуда

Делительные воронки на 300 мл, ГОСТ 8613-75, мерные колбы на 100 мл, ГОСТ 22524-77, микропипетки, ГОСТ 20292-74, колбы грушевидные на 25 мл, ГОСТ 10394-72, цилиндры мерные на 5, 10, 100 мл. Камера для хроматографирования, ГОСТ 10565-75. Хроматографические пластинки "Силуфол", производство ЧССР. Пульверизатор стеклянный для обработки пластинок, ГОСТ 10391-74, водяная баня, ТУ 64-1-2850-76, электроплитка, аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-2451-78, колбы конические на 250 мл с притертыми пробками, сушильный шкаф, ТУ 64-1-1411-76.

2.6. Отбор, хранение и доставка проб

Отбор проб воды проводится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов, окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.79 за N 2051-79г. Отобранные пробы хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в сухом и защищенном от света месте не более 2-х суток.

2.7. Проведение определения

Пробу воды (100 - 200 мл) помещают в колбу с притертой пробкой, добавляют н-гексан (10 - 20 мл) и оставляют на ночь или экстрагируют на аппарате для встряхивания в течение 2-х часов. Затем пробу переносят в делительную воронку, добавляют еще 10 - 20 мл гексана, энергично встряхивают, дают отстояться и отделяют гексан от воды. Объединенный экстракт сушат сульфатом натрия (5 - 10 г) и упаривают на водяной бане при температуре 35 - 40 °С. Выпаренный осадок растворяют в гексане и проводят хроматографирование. На пластинку наносят 0,1 мл растворителя так, чтобы размеры пятен не превышали 5 - 6 мм. Слева и справа от пробы наносят 3 - 5 мкг стандартного раствора.

Пластинку высушивают и опускают в хроматографическую камеру.

Приготовляют одну из подвижных фаз за 30 - 40 мин., наливают на дно камеры

и опускают пластинку. Готовую пластинку оставляют на воздухе для просушки,

опрыскивают проявляющим реактивом. Байлетон проявляется, как правило, в

виде двух синих пятен на желтом фоне с R - 0,22 и R - 0,56 на пластинке

f1 f2

"Силуфол".

2.8. Обработка результатов анализа

Полуколичественное определение проводится путем визуального сравнения интенсивности окраски и размера пятен пробы и стандартных растворов.

Для определения количественного содержания байлетона в воде используют следующую формулу:

А х S

2

Х = ------,

Р х S

1

где:

Х - содержание байлетона в мг/л;

А - количество стандартного раствора (в мкг);

S - площадь пятна стандартного раствора (в мкг);

1

S - площадь пятна пробы (в мкг);

2

Р - количество пробы, взятой для анализа (в мл и г).

3. Требования безопасности

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсическими веществами.

Литература

Бажанова Н.В., Аветисян К.В., Папоян Ф.А.

Методические указания по определению фунгицида байлетона методом ТХС в почве, корнях, зеленых листьях, плодах томатов и огурцов.

Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде. М., 1981. С. 159 - 165.

Настоящие Методические указания разработаны и апробированы Г.Н. Булычевой при изучении влияния байлетона на санитарный режим водоема и при выполнении исследовательских работ по обоснованию ПДК байлетона в воде водоемов на кафедре общей гигиены, Рязанский медицинский институт.