При использовании метода внешнего стандарта определяют площади или высоты пиков и затем устанавливают градуировочную характеристику, аппроксимируемую уравнением второго порядка.
Содержание D-биотина, w, мкг/100 г пробы, вычисляют по формуле (1):
, (1)
где 
- массовая концентрация D-биотина в растворе пробы (6.2), мкг/см3, вычисленная при помощи градуировочной характеристики;
Ve - объем раствора пробы (6.2), см3;
ms - масса пробы, г;
100 - множитель для пересчета содержания D-биотина к 100 г пробы.