"Методические указания по определению дифенамида в воде методом тонкослойной хроматографии" (утв. Минздравом СССР 21.11.1985 N 4033-85)

Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

21 ноября 1985 г. N 4033-85

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДИФЕНАМИДА В ВОДЕ МЕТОДОМ

ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

1. Характеристика анализируемого пестицида

Активное вещество дифенамида (синонимы: димид, зарур, ридеон, энид) - N,N,диметил-2,2-дифенилацетамид:

___

───

/ \

\\ //

─── O CH

\ || / 3

CH-C-N C H NO

___ / \ 16 17

─── CH

/ \ 3

\\ //

───

Молекулярная масса дифенамида - 239,26.

Дифенамид - белое кристаллическое вещество с темп. пл. 134,5 - 135,5 °С. Растворимость при 25 °С (г/л): в ацетоне - 190, в ксилоле - 50, диметилформамиде - 160, в воде - 0,26.

Используется в виде 80-процентного с.п. ЛД для белых крыс 2500 мг/кг,

50

для мышей 700 мг/кг, ПДК в воде - 1,2 мг/л.

Дифенамид активен против большого числа сорняков. Применяется в качестве почвенного гербицида для борьбы с сорняками в посевах томатов, перца, земляники, картофеля, табака и некоторых других культур.

2. Методика определения дифенамида в воде

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на экстракции пестицида из воды хлороформом, концентрировании экстракта и хроматографировании его в тонком слое адсорбента.

Подвижным растворителем служит смесь н-гексана, ацетона и аммиака в соотношении 10:5:0,8.

Проявление хроматограмм осуществляют 1-процентным раствором фосфорномолибденовой кислоты в этаноле с последующим облучением УФ-светом.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Диапазон определяемых концентраций - 1 - 10 мкг.

Предел обнаружения - 1 мкг, для воды - 0,05 мг/л.

Размах варьирования - 15%.

Среднее значение определения стандартных количеств пестицида - 74,5%.

Стандартное отклонение - 9,1%.

Доверительный интервал среднего при альфа = 0,95, n = 5, с = 74,5 +/- 6,4.

Определению дифенамида могут мешать соединения, содержащие аминогруппу

и имеющие близкое значение величины R .

f

2.2. Реактивы и растворы

Аммиак, 25-процентный, ГОСТ 3760-64.

Ацетон, х.ч., ГОСТ 2603-79.

н-Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78.

Сульфат натрия, безводный, ч., ГОСТ 4166-76.

Спирт этиловый ректификат, 96-процентный, ТУ 6-09-1710-77.

Стандартный раствор дифенамида (концентрация 500 мкг/мл).

Растворяют 0,025 г х.ч. пестицида в 50 мл ацетона. Раствор устойчив в течение 1 месяца.

Пластинки "Силуфол" (ЧССР), размер 140 х 140 мм.

Фосфорномолибденовая кислота, х.ч., ТУ 6-09-3540-78. Готовят 1-процентный раствор в этиловом спирте. Расход реактива - 1 мл на 1 пластинку.

Хлороформ, ч.д.а., ГОСТ 20015-74.

2.3. Посуда и приборы

Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.

Воронка делительная емк. 250, 500 мл, ГОСТ 10054-75.

Испаритель вакуумный ротационный ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Камера для опрыскивания пластинок, ТУ 25-11-430-70.

Камера для хроматографирования, ГОСТ 10565-75.

Колбы круглодонные для отгонки растворителя, ГОСТ 10394-72.

Колбы мерные емк. 50 - 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Лампа кварцевая ПРК-4, ПРК-7, ТУ 16-535-280-74.

Микропипетка на 0,1 мл с ценой деления 0,01 мл, ГОСТ 1770-74.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74.

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, емк. 10, 25, 50, 250 мл.

2.4. Проведение определения

2.4.1. Экстракция. 200 мл воды (рН = 7,5) помещают в делительную воронку и трижды экстрагируют хлороформом порциями по 50 мл в течение 5 мин. каждый раз. Экстракты объединяют, пропускают через химическую воронку, заполненную безводным сернокислым натрием, упаривают на ротационном испарителе до 0,05 - 0,1 мл и количественно наносят на пластинку "Силуфол".

2.4.2. Хроматографирование

Экстракты с помощью пипетки наносят на пластинку для

хроматографирования, рядом (на расстоянии 2 см) с пробами наносят

стандартный раствор дифенамида в количестве 3, 5, 10 мкг, что соответствует

6, 10, 20 мкл. Производят хроматографирование в смеси растворителей

н-гексан, ацетон, аммиак = 10:5:0,8. Когда растворитель поднимется на

высоту 10 см, пластинку вынимают, сушат и опрыскивают 1-процентным

раствором фосфорномолибденовой кислоты так, чтобы фон пластинки был светло-

зеленый. Тщательно сушат пластинку и облучают УФ-светом 5 - 10 мин. При

наличии дифенамида в анализируемой пробе появляется пятно синего цвета,

величина R которого равняется 0,35 - 0,37.

f

2.4.3. Обработка результатов анализа

Количественное определение производится путем сравнения площади пятна пробы и того стандарта, площадь которого наиболее близка по величине к площади пятна пробы. Измерение площадей осуществляется с помощью промасленной миллиметровой бумаги. Пропорциональная зависимость между площадью пятна и концентрацией препарата наблюдается в пределах от 1,0 до 10 мкг. При большем содержании препарата на пластинку наносят часть экстракта.

Содержание препарата в анализируемой пробе в мг/л (Х) рассчитывают по формуле:

А х S

2

Х = ------,

Р х S

1

где:

А - количество, мкг, стандартного раствора препарата;

S - площадь пятна стандартного раствора, кв. мм;

1

S - площадь пятна пробы, кв. мм;

2

Р - количество, мл, воды, взятой на анализ.

3. Требования техники безопасности

Соблюдать требования техники безопасности, обычно рекомендуемые для работы с органическими растворителями, УФ-светом.

4. Разработчики

Д.б.н. М.А. Клисенко, к.х.н. Н.И. Киселева, С.И. Гнед (ВНИИГИНТОКС).