"Методические указания по определению препарата ЭФ-165 (эфогама) в зерне методом газожидкостной хроматографии" (утв. Минздравом СССР 27.11.1984 N 3150-84)

Утверждены

Минздравом СССР

27 ноября 1984 г. N 3150-84

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ПРЕПАРАТА ЭФ-165 (ЭФОГАМА) В ЗЕРНЕ

МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

--------------------------------

<*> Разработаны М.В. Письменной, М.А. Клисенко (ВНИИГИНТОКС).

Краткая характеристика препарата. Брутто-формула препарата ЭФ-165

(эфогама) C H O PS. Молекулярная масса 281,1. Препарат обладает

12 27 3

гаметацидными свойствами. Т. кип. 150 °C при 267 - 400 Па. Растворяется в

большинстве органических растворителей, нерастворим в воде.

Принцип метода. Метод основан на газохроматографическом определении препарата ЭФ-165 после извлечения его из зерна (пшеница, рожь) эфиром, перераспределении в этанол и очистке от белков путем вымораживания последних из спиртового раствора.

Метрологическая характеристика метода. Диапазон линейной зависимости величины хроматографического сигнала от количества введенного в хроматограф препарата ЭФ-165 0,1 - 1,5 нг. Нижний предел определения в зерне 0,014 мг/кг. Среднее значение определения 85%.

Стандартное отклонение 6,7%. Доверительный интервал среднего (при p = 0,95, n = 5) 85 +/- 8%.

Избирательность метода. Другие фосфорорганические пестициды не мешают определению, время удерживания эфогама по отношению к метафосу 0,58.

Реактивы и растворы. Диэтиловый эфир х.ч. Ацетон х.ч. Этиловый спирт

96-процентный. Фильтры бумажные "красная лента". Сульфат натрия безводный

ч.д.а. Азот особой чистоты, содержание O не более 0,003%. Водород из

2

баллона или получаемый из генератора водорода. Воздух из баллона или

нагнетаемый компрессором. Основной стандартный раствор (N 1) препарата

ЭФ-165 в ацетоне (500 мкг/мл). Хранят в холодильнике 2 мес. Рабочие

стандартные растворы препарата ЭФ-165 в ацетоне (0,5; 1,0; 2,0; 5,0 мкг/мл)

готовят из раствора N 1. Готовят ежедневно, хранят в холодильнике.

Приборы и посуда. Хроматограф марки "Цвет" или другой марки с ТИД. Прибор для отгонки растворителей (ротационный вакуумный испаритель) типа ИР-1М. Аппарат для встряхивания колб. Колбы: мерные на 25; 50 и 100 мл; конические на 50 и 250 мл; грушевидные на 50 мл. Воронки химические. Пробирки мерные на шлифах вместимостью 5 мл. Пипетки на 1; 5 и 10 мл. Микрошприцы на 10 мкл.

Ход анализа. Экстракция. Измельченное до размера частиц 2 - 3 мм зерно пшеницы, ржи (25 г) помещают в коническую колбу со шлифом, заливают 50 мл диэтилового эфира и экстрагируют в течение 1 ч на аппарате для встряхивания. Фильтруют растворитель через бумажный фильтр "красная лента" с насыпанным на него слоем (4 - 5 г) безводного сульфата натрия. Зерно дважды промывают эфиром порциями по 20 мл и присоединяют смывы к экстракту. Упаривают эфир приблизительно до объема 5 мл, прибавляют 3 мл этанола и продолжают упаривать, чтобы полностью удалить эфир. Колбу с оставшимся этанольным экстрактом помещают на 30 мин. в холодильник (температура минус 4 - 5 °C), а затем фильтруют экстракт в мерную пробирку через бумажный фильтр "красная лента", смоченный этанолом. Доводят объем в пробирке этанолом до 3 мл, хорошо перемешивают и хроматографируют.

Условия хроматографирования. Хроматограф "Цвет" с ТИД, солевой

наконечник CsBr. Колонка стеклянная спиральная, длина 1 м с диаметром 3 мм,

заполненная хроматоном N-AW-HMDS (0,16 - 0,20 мм) с 5% SE-30. Рабочая шкала

-10

электрометра 2 x 10 А. Скорость протяжки ленты 240 мм/ч. Температура

испарителя 210 °C, термостата колонки 190 °C. Расход газа-носителя 24

мл/мин., водорода 14 - 17 мл/мин., воздуха 400 мл/мин.

При определении вводят в хроматограф последовательно по 3 - 5 мкл рабочего стандартного раствора препарата ЭФ-165, содержащего 0,5 - 1,0 мкг/мл, и пробу. Нижний предел обнаружения 0,1 нг. Время удерживания препарата ЭФ-165 на 5% SE-30 - 2 мин. 30 с.

Обработка результатов анализа. Количественное определение проводят методом соотношения со стандартом по высоте или площадям хроматографических пиков. Расчет содержания пестицида в пробе (X, мг/кг или мг/л) проводят по формуле:

CHV

X = ------,

H V P

ст 1

где:

C - количество пестицида в хроматографируемом объеме стандартного

раствора, нг;

H - высота пика на хроматограмме стандарта, мм;

ст

H - высота пика на хроматограмме пробы, мм;

V - общий объем анализируемого экстракта, мл;

V - хроматографируемый объем пробы, мкл;

1

P - навеска анализируемой пробы, г.

Требования безопасности. Необходимо соблюдать правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.