Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
В.И.ЧИБУРАЕВ
28 сентября 1989 г. N 5108-89
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ СОДЕРЖАНИЯ
ГВАЯКОЛА И О-АНИЗИДИНА НА КОЖЕ
/ \
│ О │_OCH
\ / 3
│
OH М.м. 124,13
Гваякол (о-метоксифенол) - бесцветные кристаллы со слабым ароматическим запахом. Т. кип. 205 °C, плотность 1,12 - 1,13, хорошо растворяется в обычных органических растворителях. Гваякол вызывает экземы, поверхностные омертвления.
/ \
│ О │_OCH
\ / 3
│
NH М.м. 123,16
2
о-Анизидин (2-аминоанизол) - бесцветная жидкость. Т. кип. 225 °C, хорошо растворим в спирте и эфире. Хорошо всасывается через кожу. Является метгемоглобинообразователем.
Методика основана на газохроматографическом определении гваякола и о-анизидина с использованием пламенно-ионизационного детектора.
В качестве смывающей жидкости используется дистиллированная вода.
Диапазон измеряемого содержания 0,0025 - 0,025 мг/кв. см.
Определению не мешает дихлорэтан.
Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 15%.
ПДУ гваякола и о-анизидина на коже не установлены.
Гваякол, перегнанный при Т = 205 °C.
о-Анизидин, МРТУ 6-09-1752-64.
Дихлорэтан, ГОСТ 1942-74.
Инертон N-AW-DMCS - твердый носитель для газовой хроматографии (0,16 - 0,20 мм).
Полиметилфенилсилоксановое масло ПФМС-4 - жидкая фаза для хроматографии.
Азот газообразный, ГОСТ 9293-74, в баллонах с редуктором.
Водород газообразный, ГОСТ 3022-80, в баллонах с редуктором.
Воздух от компрессора СО-7А.
Основные растворы гваякола и о-анизидина готовят в мерной колбе на 100 мл растворением в дистиллированной воде 100 мг каждого из веществ. Срок хранения - в течение месяца в холодильнике. Рабочие растворы с содержанием 0,0055 мг/мл; 0,011 мг/мл; 0,022 мг/мл; 0,033 мг/мл и 0,055 мг/мл готовят соответствующим разбавлением основного раствора дистиллированной водой.
Рабочие растворы устойчивы в течение двух недель в холодильнике.
Материал для смыва - вата гигроскопическая.
Хроматограф серии "Цвет"-100 с детектором ионизационно-пламенным.
Хроматографическая колонка стеклянная, размером (100 x 0,3) см.
Колбы мерные вместимостью 100 мл и 25 мл, ГОСТ 1770-74.
Пипетки на 1,5 и 10 мл, ГОСТ 20292-74.
Микрошприц МШ-10, ТУ 2.833.106.
Пинцет медицинский.
Фарфоровая чашка диаметром 120 мм.
Логарифмическая линейка.
Условия проведения смыва
Смыв с кожных покровов проводится способом обмыва. Для этого в фарфоровую чашку наливают 20 мл дистиллированной воды. Ватным тампоном (0,3 г), смоченным в воде, обмывают участок кожного покрова (100 кв. см) сверху вниз. При этом тампон несколько раз опускают в чашку с водой. Общий объем пробы составляет 25 мл. Одновременно проводят смыв с кожи у рабочих, не контактирующих с определяемыми веществами. Пробы устойчивы в течение суток.
Условия анализа
Вату отжимают, промывают 1 мл дистиллированной воды, вновь отжимают. Из полученного экстракта 1 мкл вводят в испаритель хроматографа для анализа.
Хроматографическую насадку готовят следующим образом: жидкую фазу ПФМС-4 в количестве 15% от веса носителя растворяют в хлороформе, этим раствором заливают твердый носитель инертон N-AW-DMCS, смесь нагревают на водяной бане при перемешивании до полного испарения хлороформа. Затем с помощью вакуумного насоса полученной насадкой заполняют хроматографическую колонку. Колонку кондиционируют 24 ч в токе азота при постоянном повышении температуры колонки от 50 до 200 °C без подключения к детектору. Прибор для работы готовят согласно инструкции.
Температура колонки 120 °C.
Температура испарителя 250 °C.
Скорость азота 40 мл/мин.
Скорость водорода 40 мл/мин.
Скорость воздуха 400 мл/мин.
Скорость диаграммной ленты 240 мм/ч.
Объем вводимой пробы 1 мкл.
Время удерживания: гваякола 3 мин. 15 с,
о-анизидина 6 мин. 8 с.
Количественное определение гваякола и о-анизидина проводят методом абсолютной градуировки к площадям пиков. Для построения градуировочной характеристики гваякола и о-анизидина в испарителе хроматографа вводят 1 мкл рабочих растворов известного содержания 5,5; 11,0; 22,0; 33,0; 55,0 мкг/мл пятикратной повторности. На основании полученных данных строят градуировочный график зависимости площади пика от количества введенного вещества.
Условия анализа пробы и калибровки должны быть идентичны.
Концентрацию гваякола и о-анизидина C (мг/кв. см) вычисляют по формуле:
Q
C = -,
S
где Q - количество гваякола или о-анизидина во всей пробе, мг;
S - площадь исследуемой части тела, кв. см.