4. Диагностика

"Инструкция о мероприятиях по профилактике и мерам борьбы с фурункулезом лососевых рыб" (утв. Минсельхозпродом России 26.11.1997 N 13-4-2/1090)

4. Диагностика

4.1. Диагноз на фурункулез устанавливают на основании эпизоотических данных, клинических признаков, патолого-анатомических изменений, результатов бактериологического исследования и положительной биопробы.

4.2. Для бактериологического исследования берут не менее 5 экземпляров больных рыб.

4.3. Бактериологическая диагностика основана на выделении культуры Aeromonas salmonicida.

4.4. Посевы делают из крови, внутренних органов и невскрывшихся абсцессов больных рыб на пластинчатые плотные питательные среды: мясо-пептонный агар или агар Хоттингера, агар Д и выдерживают при температуре 18 - 25 °C в течение не менее 48 часов.

4.5. В посевах на жидких питательных средах возбудитель растет, образуя рыхлый осадок и тонкую сероватую пленку, в то время как весь столбик среды остается прозрачным. Через 7 - 10 дней поверхностный слой бульона приобретает коричневый цвет, который в дальнейшем усиливается и распространяется на всю среду. Слабовирулентные формы Aeromonas salmonicida дают гладкие, выпуклые колонии и помутнение бульона в первые сутки. На плотных питательных средах вырастают уплощенные колонии, с гладкой блестящей поверхностью и ровными краями, диаметром около 3 мм. Через 2 - 3 дня питательная среда приобретает коричневый цвет в результате диффундирования в нее из колонии образующегося водорастворимого пигмента (меланина).

4.6. Aeromonas salmonicida - грамотрицательная, неподвижная, короткая палочка, размером 0,5 - 1,0 x 1,5 - 2 мкм, спор и капсул не образует, цитохромоксидазаположительная. Бактерия разжижает желатин, образует бутандиолдегидрогеназу; не образует индол, ацетилметилкарбинол и сероводород. Из короткого ряда углеводов ферментирует с образованием кислоты и газа глюкозу, маннит и мальтозу, лактозу не ферментирует. Большинство штаммов сахарозу не ферментирует, но встречаются сахарозоположительные биотипы.

4.7. Обязательна проверка способности к росту при температуре 37 °C. Выделенную культуру засевают в две пробирки со скошенным агаром. Инкубируют одну при 37 °C, вторую при 25 °C. При температуре 37 °C Aeromonas salmonicida не растет.

4.8. Определение вирулентности выделенных культур аэромонад проводят на двухлетках форели. Для заражения используют смыв физиологическим раствором 24 - 48 часовых культур, которые вводят рыбам внутримышечно или внутрибрюшинно в дозе 0,1 мл и наблюдают за ними в течение 10 дней. Каждой культурой заражают 5 рыб. Температура воды в аквариуме должна быть 14 - 15 °C. Контрольным рыбам вводят стерильный физиологический раствор.

4.9. Биопроба считается положительной при появлении у форели клинических признаков фурункулеза и развитии септического процесса через 2 - 3 суток после заражения с последующим выделением от них исходной культуры (пп. 4.4, 4.5 и 4.6).